山东大学学报(医学版)

作者：王艺博,王颖超,徐琳琳,黄淑红,党宁宁

单位：1.山东第一医科大学附属省立医院皮肤科;2.山东第一医科大学临床与基础医学院, 山东 济南 250021

关键词：烟草烟雾提取物,Klotho,CHRNA5,角质形成细胞,皮肤衰老,

基金：国家自然科学基金(82273527,82573992);山东省自然科学基金(ZR2022MH242)

目的 探讨烟草烟雾导致抗衰老蛋白Klotho与烟碱型乙酰胆碱受体CHRNA5表达变化调控皮肤衰老的机制。 方法 采用烟草烟雾提取物(cigarette smoke extract, CSE)处理HaCaT角质形成细胞,通过β-半乳糖苷酶染色及Western blotting检测细胞衰老相关表型及CHRNA5、Klotho蛋白表达变化。随后,在3~5月龄、6~7月龄及14月龄小鼠中,利用HE染色、免疫组化、Western blotting及RT-qPCR分析皮肤组织中CHRNA5、Klotho及衰老相关标志物的年龄依赖性变化。进一步地,在野生型与Klotho基因敲低小鼠中,通过免疫组化、Western blotting及RT-qPCR验证Klotho敲低效率,并检测Klotho基因对CHRNA5及衰老标志物的表达的影响。最后,对HaCaT细胞分别进行Klotho或CHRNA5的siRNA干扰,采用Western blotting及RT-qPCR检测两者及相关衰老标志物的表达,以验证其相互关系。 结果 CSE处理可诱导HaCaT细胞衰老,表现为β-半乳糖苷酶染色阳性细胞显著增加(P=0.000 4),同时伴随CHRNA5蛋白水平显著上调(P=0.000 2)及Klotho蛋白水平下调(P=0.002 5)。在14月龄小鼠衰老小鼠相较于3–5月龄小鼠,皮肤表皮厚度减少(P<0.000 1),CHRNA5升高(P=0.000 9),而Klotho降低(P=0.000 1)。在Klotho基因敲低小鼠中,皮肤组织出现加速衰老表型,并伴随CHRNA5上调(P=0.010 7)。在Klotho敲低的HaCaT细胞中,同样观察到衰老标志物上升及CHRNA5表达增强(P=0.034 7)。相反,CHRNA5敲低可显著降低p16和p21等衰老相关标志物的表达(P=0.002 3; P=0.005 4)。 结论 烟草提取物可以下调Klotho表达,及上调CHRNA5表达促进角质形成细胞衰老,进而促进皮肤衰老。

来源：2026年第1期

《山东大学学报(医学版)》期刊编辑部

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