山东大学学报(医学版)

作者：于丽,王弋嘉,杨勇,刘学焕,万雪花,包翠萍,苗蓓亮,李斯琪,李静,刘筠

单位：1. 天津中医药大学中西医结合学院, 天津301617;2. 南开大学附属人民医院转化医学院, 天津300121;3. 之江实验室前沿基础研究中心, 浙江 杭州311100;4. 南开大学泰达生物技术研究院, 天津300457;5. 中国中医科学院望京医院肾病内分泌科, 北京100102;6. 天津市第四中心医院影像科, 天津300142

关键词：具核梭杆菌,结直肠癌,自噬,光学表面波技术,细胞折射率,

基金：天津市自然科学基金(21JCYBJC00120);国家自然科学基金(12174203)

目的 拟利用光学表面波传感技术,探索具核梭杆菌(fusobacterium nucleatum, Fn)介导的自噬水平与细胞折射率变化的关系,初步探究光学表面波技术对癌细胞自噬水平检测的潜力。 方法 运用CCK-8技术检测Fn对结直肠癌细胞增殖活力的影响,蛋白免疫印迹法及自噬双标荧光法检测Fn对自噬水平的影响,同时采用光学表面波技术检测不同Fn感染状态下细胞折射率的变化,观察其与自噬水平的相关性。 结果 当感染复数为100,感染时间为4 h时,自噬起始蛋白苄氯素1(Beclin-1)、微管相关蛋白 1A/1B-轻链 3(microtubule-associated protein 1A/1B light chain 3,LC3)蛋白表达水平升高(均P<0.05),螯合体1(sequestome, P62/SQSTM1)蛋白表达水平降低(P<0.01),自噬水平升高;同时光学检测结果显示,HCT116、HT29细胞的折射率亦随自噬水平的增高而升高(均P<0.01)。进一步研究表明,细胞折射率的变化主要在于细胞内自噬小体水平的变化,且不受细胞增殖及胞外物质等因素影响。 结论 Fn介导的自噬水平与细胞折射率具有相关性,可实时反映Fn介导的自噬水平的变化,表明光学表面波技术可作为一种快速、直观且不影响细胞活性的检测自噬水平的技术。

来源：2024年第10期

《山东大学学报(医学版)》期刊编辑部

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