山东大学学报(医学版)

作者：姜子晗,芦兴晨,孙露,赵蕙琛,左丹,马小莉,刘元涛,张玉超

单位：1.青岛大学附属青岛临床医学院 青岛市市立医院, 山东 青岛 266011;2.山东大学齐鲁医院(青岛)临床营养科, 山东 青岛 266011;3.青岛市市立医院内分泌科, 山东 青岛 266011;4.青岛市市立医院医学杂志编辑部, 山东 青岛 266011;5.山东大学齐鲁医院(青岛)内分泌科, 山东 青岛 266011

关键词：孤核受体NR4A1,人脐静脉内皮细胞,IκBα蛋白,NF-κB核转位,细胞凋亡,

基金：山东省自然科学基金面上项目(ZR2022MH086);山东省医药卫生科技发展计划(202103060651);2021年度青岛市医药卫生科研计划(2021-WJZD005)

目的 探讨过氧化氢(H2O2)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)氧化应激中孤核受体NR4A1表达变化,以及其对细胞凋亡的影响及机制。 方法 使用不同浓度及时间梯度H2O2处理HUVECs,采用CCK-8法检测细胞活性,TUNEL法检测细胞凋亡,Western blotting法检测Bcl-2、Bax与NR4A1蛋白表达;采用siRNA转染建立敲低NR4A1与对照的HUVECs,分为si-NC组及si-NR4A1组,H2O2处理后检测各组细胞抑凋亡蛋白Bcl-2、凋亡蛋白Bax表达,TUNEL法检测细胞凋亡;采用慢病毒感染建立稳定过表达NR4A1与对照的HUVECs,并进行H2O2处理,分为空载对照组(NC组)、过表达组(OV组)、NC+H2O2组及OV+H2O2组。TUNEL法检测各组细胞凋亡、Western blotting法检测各组中NR4A1、Bcl-2、Bax、总IκBα的蛋白表达、P65蛋白在细胞核/质定位。 结果 200 μmol/L H2O2处理细胞6 h,HUVECs活力显著下降,凋亡水平显著上升,Bax/Bcl-2比值升高(P<0.001);NR4A1蛋白表达量增加;与si-NC组相比,si-NR4A1组在H2O2处理后细胞凋亡率、Bax/Bcl-2比值下降(P<0.001);OV+H2O2组细胞凋亡率、Bax/Bcl-2比值较NC+H2O2组显著降低(P<0.001);相较于NC+H2O2组,P65蛋白在OV+H2O2组中细胞核内表达显著降低(P<0.05),细胞质内表达显著上调(P<0.001);与NC+H2O2组相比,OV+H2O2组总IκBα表达上调(P<0.001)。 结论 H2O2诱导HUVECs发生细胞凋亡;HUVECs内NR4A1蛋白过表达可抑制细胞凋亡,其作用机制可能与调控IκBα的表达与抑制NF-κB的核转位有关。

来源：2024年第3期

《山东大学学报(医学版)》期刊编辑部

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