山东大学学报(医学版)

作者：芦兴晨,强晔,刘昕宇,左丹,姜子晗,张玉超,刘元涛,马小莉

单位：1.青岛大学附属青岛临床医学院 青岛市市立医院, 山东 青岛 266011;2.康复大学青岛医院(青岛市市立医院)内分泌中心, 山东 青岛 266011;3.烟台毓璜顶医院莱山分院临床营养科, 山东 烟台 264000;4.康复大学青岛医院(青岛市市立医院)医学杂志编辑部, 山东 青岛 266011;5.山东大学齐鲁医院内分泌科(青岛), 山东 青岛 266011

关键词：NR4A1,C2C12肌管细胞,磷酯酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B信号通路,毒胡萝卜素,糖代谢,

基金：山东省自然科学基金面上项目(ZR2022MH086);山东省医药卫生科技发展计划项目(202103060651);2021年度青岛市医药卫生科研计划项目(2021-WJZD005)

目的 探讨NR4A1对毒胡萝卜素(TG)诱导小鼠C2C12肌管细胞糖代谢功能障碍的影响及机制。 方法 体外诱导C2C12细胞分化为成熟肌管细胞,将加入20 nmol/L胰岛素刺激10 min的细胞标记为胰岛素组,未做特殊处理的细胞标记为对照组,采用Western blotting法检测磷酯酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路、NR4A1蛋白水平。采用CCK8法检测TG浓度梯度处理的C2C12肌管细胞活力,建立糖代谢损伤细胞模型。将C2C12肌管细胞分为对照组、无水乙醇(EtOH)组、TG组,分别处理后加入胰岛素刺激,采用葡萄糖试剂盒检测葡萄糖消耗水平,采用Western blotting法检测NR4A1、p-PI3K、p-AKT蛋白表达。采用慢病毒感染并筛选,获得对照与稳定过表达NR4A1的C2C12肌管细胞,并进行TG处理,分为Ad-NC组、Ad-NC+EtOH组、Ad-NC+TG组和Ad-NR4A1+TG组。分化成熟后加入胰岛素刺激,检测葡萄糖消耗水平,检测NR4A1、p-PI3K、p-AKT的表达。 结果 与对照组相比,胰岛素组C2C12肌管细胞PI3K/AKT通路磷酸化水平及NR4A1表达水平显著升高(P<0.01)。CCK-8结果显示,TG浓度大于1 μmol/L时,细胞活力显著下降(P<0.01)。与EtOH组相比,TG组葡萄糖消耗减少,NR4A1表达水平下降,PI3K/AKT蛋白磷酸化水平受到抑制(P均< 0.01)。胰岛素刺激C2C12肌管细胞,与Ad-NC+TG组相比,Ad-NR4A1+TG组葡萄糖消耗增加(P<0.05)、PI3K/AKT信号通路显著活化(P<0.05)。 结论 TG导致C2C12肌管细胞糖代谢功能障碍。NR4A1对TG诱导的C2C12肌管细胞糖代谢障碍具有改善作用,其机制可能通过PI3K/AKT信号途径发挥作用。

来源：2023年第11期

《山东大学学报(医学版)》期刊编辑部

查看山东大学学报(医学版)杂志2023年第11期