山东大学学报(医学版)

作者：杜甜甜,李娟,赵颖慧,段伟丽,王景,王允山,杜鲁涛,王传新

单位：1.山东大学第二医院检验医学中心 山东大学齐鲁医学院, 山东 济南 250033;2. 山东省肿瘤标志物检测工程实验室, 山东 济南 250033

关键词：结直肠癌,长链非编码RNA,外泌体,诊断,细胞增殖,

基金：国家自然科学基金(2019GHZ003,82002228);山东省重点研发计划(2020CXGC011304);山东省自然科学基金(ZR2020QH280)

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC02474在结直肠癌组织及循环外泌体中的表达特征及其对结直肠癌发生发展的影响。 方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测LINC02474在30例结直肠癌患者组织及128例结直肠癌患者和128例健康对照者血清中的相对表达量;使用电子显微镜检测分离所得外泌体的形态特征;使用纳米粒子跟踪分析(NTA)检测分离所得外泌体的粒径大小;Western blotting检测外泌体表面标志物的表达;CCK-8实验、平板克隆形成实验和实时细胞分析系统(RTCA)检测干扰LINC02474后DLD-1细胞的增殖;采用trans基因预测等生物信息学方法分析预测获得LINC02474的潜在靶基因。 结果 qRT-PCR检测结果显示,LINC02474在结直肠癌组织中呈高表达,差异有统计学意义(U=213.0, P<0.001)。电子显微镜结果显示,分离所得外泌体呈盘状囊泡结构,大小分布集中于96.9 nm处,且表达表面标志物CD9、CD63和TSG101。CCK-8实验、平板克隆形成实验和RTCA检测结果表明,干扰LINC02474的表达可以抑制结直肠癌细胞的增殖及成瘤能力,差异有统计学意义(CCK-8实验:t=2.640, P=0.046;平板克隆形成实验:t=2.745, P=0.016;RTCA检测:t=28.44, P<0.001)。KEGG和GO富集分析结果显示,LINC02474的潜在靶基因多富集在mTOR及MAPK等信号通路。 结论 LINC02474在结直肠癌患者组织和血清外泌体中呈高表达特征,干扰其表达可以抑制结直肠癌细胞的增殖及成瘤能力。

来源：2021年第10期

《山东大学学报(医学版)》期刊编辑部

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