山东大学学报(医学版)

作者：罗慧臣,胡丹慧,张济

单位：南华大学附属第一医院 1.风湿免疫科;2.新生儿科;3.风湿免疫实验室, 湖南 衡阳 421001

关键词：狼疮性肾炎,miR-203-3p,髓细胞触发受体1基因,TGF-β1/p38MAPK信号通路,

基金：衡阳市科技局指导性项目(2019208)

目的 探讨miR-203-3p对狼疮性肾炎(LN)小鼠肾小管上皮细胞增殖凋亡的影响及其可能的分子机制。 方法 选取自发性LN小鼠(LN组)和野生型C57BL/6小鼠(NC组)各8只,应用qRT-PCR法检测肾组织miR-203-3p表达水平,Western blotting法检测肾组织中髓细胞触发受体1基因(TREM1)蛋白表达水平。分离LN小鼠肾小管上皮细胞,并将miR-203-3p模拟物(miR-203-3p mimic)及其阴性对照(miR-NC)转染至肾小管上皮细胞中,采用qRT-PCR法检测转染后肾小管上皮细胞中miR-203-3p表达水平;CCK-8法检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;ELISA法检测细胞中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)和白介素6(IL-6)的表达水平;Western blotting法检测细胞中TREM1、Bax、Bcl-2、转化生长因子-β1(TGF-β1)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)和p38MAPK等蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测miR-203-3p与TREM1之间的靶向关系。 结果 与NC组小鼠比较,LN组小鼠肾组织中miR-203-3p表达水平降低(P<0.001),而TREM1蛋白表达水平升高(P<0.001)。miR-203-3p过表达可显著抑制LN小鼠肾小管上皮细胞中TREM1蛋白表达(F=366.230,P<0.001),并且双荧光素酶报告基因实验证实TREM1是miR-203-3p的靶基因。此外,miR-203-3p过表达还可显著抑制LN小鼠肾小管上皮细胞中TNF-α、IL-1β和IL-6等炎症因子的表达(P均<0.01),并促进细胞增殖( F24 h=14.841,F48 h=21.701,F72 h=29.893,P<0.001),抑制其凋亡(F=238.700,P<0.001),同时上调细胞中Bcl-2蛋白表达水平(F=371.820,P<0.001),而下调Bax、TGF-β1和p-p38MAPK等蛋白表达水平(FBax=225.640,FTGF-β1=27.090,Fp-p38MAPK=103.250,P<0.001)。 结论 miR-203-3p通过靶向下调TREM1蛋白表达促进LN小鼠肾小管上皮细胞的增殖,抑制其凋亡,其机制可能与TGF-β1/p38MAPK信号通路的抑制有关。

来源：2021年第3期

《山东大学学报(医学版)》期刊编辑部

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