山东大学学报(医学版)

作者：张栌丹,丁晓玲,崔舒悦,程晨,魏福兰,丁刚

单位：1. 潍坊医学院口腔医学院, 山东 潍坊 261053;2. 潍坊医学院临床能力培训中心, 山东 潍坊 261053;3.山东大学口腔医学院, 山东 济南 250012

关键词：牙周膜干细胞,巨噬细胞,极化,Transwell共培养,

基金：国家自然科学基金(81570945);全牙再生与口腔组织功能重建北京市重点实验室开放课题(KFKT2019013)

目的 探讨牙周膜干细胞(PDLSCs)对外周血来源巨噬细胞的表型和功能的体外影响。 方法 分离、培养PDLSCs,并检测其间充质干细胞标志物基质细胞抗原-1(STRO-1)、表面抗原146(CD146)、表面抗原90(CD90)的表达情况及骨向、脂肪向分化能力。分离外周血来源的巨噬细胞。将PDLSCs与等量异体巨噬细胞在Transwell培养系统中37 ℃、5% CO2条件下共培养,为实验组。巨噬细胞的单独培养设置为对照组。共培养3 d后,提取巨噬细胞,采用流式细胞术检测CD14+CD206+巨噬细胞的表达情况;共培养24 h后,提取巨噬细胞,加入荧光素异硫氰酸酯标记的葡聚糖,孵育 30 min后,采用流式细胞术检测巨噬细胞的吞噬率;共同培养3 d后,取细胞培养上清,采用酶联免疫吸附法检测上清中白介素-10(IL-10)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度。 结果 PDLSCs呈梭状的成纤维细胞样,表达STRO-1、CD146和CD90,可以骨向和脂肪向分化。与对照组相比:(1)共培养组的CD14+CD206+巨噬细胞表达率明显升高［(38.73±6.32)% vs(8.39±2.71)%,t=127.7,P=0.004 9］;(2)共培养组的巨噬细胞吞噬率无显著变化［(36.7±5.1)% vs(38.6±4.3)%,t=3.904,P=0.159 6］;(3)共培养组的IL-10浓度明显升高［(382.5±18.2)pg/mL vs (198.5±11.4)pg/mL, t=76.36,P=0.000 3］, IL-6浓度显著降低［(453.1±70.42)pg/mL vs(936.7±49.9)pg/mL, t=53.12,P=0.011 5］, TNF-α浓度也显著降低［(64.9±11.3)pg/mL vs(131.7±19.3)pg/mL, t=51.48,P=0.000 6］。 结论 PDLSCs可以促使巨噬细胞向M2型极化,不影响巨噬细胞的吞噬功能,促进抗炎因子IL-10的分泌,抑制炎性因子IL-6和 TNF-α的分泌。

来源：2021年第3期

《山东大学学报(医学版)》期刊编辑部

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