山东大学学报(医学版)

作者：刘冬科,王凤山

单位：1. 山东大学齐鲁医学院药学院生化与生物技术药物研究所 化学生物学教育部重点实验室, 山东 济南 250012;2.山东省糖化学与糖生物学重点实验室, 国家糖工程技术研究中心, 山东 济南 250012

关键词：肝素,硫酸乙酰肝素,亲水相互作用色谱-质谱,双糖,鉴别,

目的 建立亲水相互作用色谱-三重四极杆质谱法(HILIC-MS/MS)同时测定肝素及硫酸乙酰肝素经肝素酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ酶切后产生的双糖含量,为肝素及硫酸乙酰肝素的鉴别提供方法和数据参考。 方法 采用PC HILIC色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以10 mmol/L乙酸铵-水溶液(A)、10 mmol/L乙酸铵-90%乙腈(B)为流动相梯度洗脱,流速0.9 mL/min,柱温40 ℃,进样量10 μL,采用电喷雾电离源、负离子多反应检测模式对肝素及硫酸乙酰肝素酶切后产生的8种双糖进行定量,比较二者的差异。 结果 所测成分在测定摩尔浓度范围内线性关系良好(r2>0.996 0),平均加样回收率为90.34%~99.62%,RSD为4.7%~6.7%,样品测定结果显示肝素与硫酸乙酰肝素双糖组成及比例差异明显。肝素中占比最大的双糖为ΔUA2S-GlcNS6S(TriS),约69.8%;硫酸乙酰肝素中占比最大的双糖为ΔUA-GlcNAc(0S),约51.0%。 结论 该法灵敏度高、稳定性好,简单快捷、准确可靠,可作为肝素与硫酸乙酰肝素的鉴别方法之一。

来源：2021年第3期

《山东大学学报(医学版)》期刊编辑部

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